PRÁCTICA No. 3: "DETERMINACIÓN DE HEMATOCRITO"

DETERMINACIÓN DE HEMATOCRITO

OBJETIVO

Aprender a realizar la prueba del hematocrito utilizando el macro y micrométodo, conocer su importancia en el diagnóstico de enfermedades y la forma adecuada de su procedimiento.

FUNDAMENTO

El hematocrito es un examen de sangre que mide el porcentaje del volumen de toda la sangre que está compuesta de glóbulos rojos. Esta medición depende del número de glóbulos rojos y de su tamaño. El resultado se expresa en porcentaje.

El hematocrito casi siempre se ordena como parte de un conteo sanguíneo completo (hemograma).

Para la realización de esta prueba, con el macrométodo, la sangre se extrae típicamente de una vena, por lo general de la parte interior del codo o del dorso de la mano.

Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor moderado, mientras que otras sólo sienten un pinchazo o sensación de picadura. Posteriormente, puede haber algo de sensación pulsátil.

Un volumen de sangre se deposita en un tubo de Wintrobe, por medio de una pipeta, hasta la marca del 10 y se debe de centrifugar. Al terminar la prueba, deben de quedar separados el plasma de la sangre y las células, depositándose en el fondo y presentando un color rojo intenso.

Para la realización del micrométodo, se utilizan unos tubos de un calibre muy delgado, llamados capilares, y pueden ser llenados con la misma sangre venosa o de capilar. Este último es el más usado, por ser más rápido y menos riesgoso al usar sangre capilar. Para su lectura se usa una escala estandarizada.

MATERIAL

v  Tubo de Wintrobe graduado de 0-100 mm

v  Pipetas Pasteur

v  Equipo para venopuncion (Tubo lila)

v  Tubos capilares azules o rojos

v  Plastilina

v  Encendedor o cerillos

v  Centrifuga

v  Microcentrifuga 

SUSTANCIAS:

Ø  Alcohol al 70%

Ø  Sangre venosa

PROCEDIMIENTO

Para macrohematocrito:

1.    Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica punción venosa. La sangre es recogida en un tubo lila con EDTA

2.    Llenar el tubo de Wintrobe con la sangre extraída con anticoagulante ayudándose de una pipeta Pasteur, comenzando desde el fondo hasta la marca superior de 100 mm, teniendo cuidado de no provocar espuma ni dejar burbujas en el tubo.

3.    Se recomienda como medida de precaución tapar el tubo con un tapón de goma para evitar la evaporación

4.    Centrifugar a 3000 rpm durante 30 minutos

5.    Leer directamente de la graduación la columna de glóbulos rojos y anotar resultados

Para Microhematocrito:

1.    Tomar la muestra en capilares rojos heparinizados directamente del dedo, o utilizar capilares azules sin heparina para sangre venosa con anticoagulante EDTA. Debe llenarse aproximadamente 70-80% del capilar, sin dejar burbujas de aire.

2.    Ocluir (tapar) el extremo del capilar que no estuvo en contacto con la sangre, con plastilina o sellando con fuego

3.    Colocar el capilar sobre la plataforma del cabezal de la microcentrifuga, con el extremo ocluido adherido al reborde externo de la plataforma

4.    Centrifugar por 5 minutos entre 10 000 y 12 000 rpm

5.    Para leer el resultado, se lleva a cabo una regla de tres, midiendo el volumen total de plasma y eritrocitos o por medio de la regleta.

6.    Para la regleta, se sostiene el tubo frente a la escala de manera que el fondo de la columna de eritrocitos, quede exactamente al mismo nivel de la línea hroizontal correspondiente al cero

7.    Desplazar el tubo a través de la escala hasta que la línea marcada con el 1.0 quede al nivel del tope del plasma.  El tubo debe de encontrarse completamente en posición vertical.

8.    La línea que pase al nivel del tope de la columna de eritrocitos indicara la fracción del volumen de estos.

OBSERVACIONES

Tras una centrifugación de la sangre total se pueden apreciar dos niveles, uno con el depósito de los glóbulos rojos, principalmente y en color rojo oscuro, otra capa blanca, de leucocitos y una delgada de color gris, que son plaquetas y finalmente otro nivel del plasma total, de un leve color amarillento. 

RESULTADOS

En el tubo de Wintrobe se mide directamente el nivel de la columna de glóbulos rojos, comparando el número de la lectura con los siguientes porcentajes:

Hombres: 47.0 ±5.0%

Mujeres: 42.0 ±5.0%

Niños (5 años) 38%-44%

Lactantes (3 meses): 37-42%

Recién nacidos: 50-58%

La sangre era de Edgar Osvaldo Pérez García, y el tubo de Wintrobe demostró un 49% de eritrocitos, estando en un rango normal.

En el tubo capilar, al comparar con la regleta, se obtubo un valor de 49%, al igual que el Wintrobe.

Sin embargo con los calculos matematicos hubo una pequeña diferencia.

Se considera a la medida total de eritrocitos, leucocitos y plasma en mm como un 100% y con la medida de solo los eritrocitos tambien en mm se obtiene su porcentaje con respecto a este por medio de una regla de tres:

Medida total= 58 mm (eritrocitos, leucocitos y plasma)

Medida de eritrocitos= 29 mm

58 mm -------------------------- 100%

29 mm ------------- x (hematocrito)

HEMATOCRITO: 50 %

CONCLUSIÓN

Con el valor hematocrito se confirma el diagnostico de diferentes enfermedades y patologías, principalmente de las anemias y la policitemia. En esta prueba se mide la cantidad de eritrocitos de la sangre en porcentaje del total, o lo que es lo mismo, el porcentaje de células que transportan  oxígeno frente al volumen total de sangre, determinado por proceso de centrifugación. En este proceso, se pueden apreciar dos niveles, las células sanguíneas que se sedimentan, y el plasma total que flota. En definitiva es la relación porcentual entre ambos lo que representa el valor hematocrito.

Normalmente, el valor hematocrito se realiza en un análisis completo de hematimetría, donde consta el recuento de hematíes.

Los patrones de los valores del hematocrito  dependen de la edad y del sexo, así como de la altitud geográfica. Otra de las observaciones a tener en cuenta es que los valores varían de un laboratorio a otro, de ahí que en los resultados de las pruebas analíticas se pongan también los valores usados; no obstante los datos mostrados anteriormente son los más comunes y consensados.

De acuerdo a esto, un índice bajo de Hematocrito puede deberse a:

       Anemia

       Fallos en la médula ósea (Radiaciones, toxinas, fibrosis, tumores, etc.)

       Embarazo

       Hemorragias

       Hipertirodismo

       Hemolisis (destrucción de glóbulos rojos) por una transfusión

       Leucemia

       Problemas de alimentación

       Artritis reumatoide

Y un índice alto de Hematocrito puede deberse a:

§       Cardiopatías

§       Deshidratación

§       Eclampsia (en el embarazo)

§       Enfermedades pulmonares crónicas

§       Exceso de formación de hematíes (eritrocitosis)

§       Policitemia vera

§       Choque (shock)

Bibliografía:

· Hematocrito, articulo web consultado el día 3 de marzo de 2012 en: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003646.htm

·         Martínez Fragoso, Vicente. Manual de Biometría Hemática. CBTis199, México, 2012. Pp. 12-13