PRACTICA No.6: "COPROPARASITOSCÓPICO: MÉTODO DE CONCENTRACION POR FLOTACION DE WILLIS"

COPROPARASITOSCÓPICO: MÉTODO DE CONCENTRACIÓN POR FLOTACIÓN DE WILLIS

Esta práctica se llevó a cabo el día jueves 22 de septiembre 2011, en las instalaciones del laboratorio para prácticas de análisis clínicos del CBTis 199, como parte del programa de 3º semestre para la preparación de la carrera de Laboratorista Clínico, en su subdivisión de técnicas parasitológicas.

OBJETIVO

 Aprender a realizar la técnica por flotación de Willis, para la búsqueda de quistes y huevos que puedan quedar en la superficie del líquido.

FUNDAMENTO

Este método fue descrito por primera vez en 1921 por Willis. Es recomendado especialmente para la investigación de geohelmintos. Consiste en  preparar el material fecal con solución saturada de NaCl (cloruro de sodio).

Los huevos y quistes de peso específico menor que la solución saturada de cloruro de sodio tienden a subir y adherirse a la superficie que este en contacto con la del líquido.

En el laboratorio por lo regular, se usa como superficie de contacto un cubreobjetos o un portaobjetos.

Este método es de alta sensibilidad en el diagnóstico de huevos livianos de helmintos y quistes de protozoarios  como:

·         Entamoeba histolytica
·         Entamoeba coli
·         Trichomona tenax
·         Ancylostoma duodenale
·         Necátor americanus
·         H. nana.

No se recomienda para la búsqueda de huevos pesados ni de larvas.

MATERIAL: v  Vaso de precipitados v  Embudo v  Gasa v  Tubo de ensayo v  Portaobjetos v  Cubreobjetos v  Gradilla v  Pipeta con propipeta v  Abatelenguas

SUSTANCIAS:

Ø  Solución saturada de NaCl
Ø  Solución de yodo-lugol
Ø  Muestra biológica: heces fecales frescas

PROCEDIMIENTO

1.    Tomar aproximadamente 1 gr de heces fecales con un abatelenguas

2.    Colocar la muestra en un vaso de precipitados y mezclar con 10 ml de solución saturada de cloruro de sodio.

3.    Filtrar la mezcla en un tubo de ensayo, usando la gasa y el embudo.

4.    Completar con solución saturada hasta el borde del tubo

            

5.    Colocar un portaobjetos sobre el tubo, de manera que el líquido haga contacto con el portaobjetos

6.    Se coloca en la gradilla y se espera de 5 a 10 minutos

7.    Retirar el portaobjetos cuidando de no tirar el material que haya quedado en él y colocar una gota de lugol.

8.    Cubrir con un cubreobjetos y observar al microscopio con objetivos 10x y 40x.

OBSERVACIONES

Frotis, 10x

Se encuentran regadas por todo el campo un gran número de bacterias. Destacan a las 6 pequeñas trazas de grasas

Frotis, 40x

Sobresale a la 1 un punto color café, pero que contenía 2 núcleos: sin duda alguna es un quiste de Entamoeba histolytica

Frotis, 40x

Desplazándose por el campo, se encontraron 2 quistes más de Entamoeba histolytica, a la una y a las dos. Ambos contenían 4 núcleos.

RESULTADOS

El resultado para huevecillos de parásitos resulto negativo. Sin embargo se encontraron 3 quistes de Entamoeba histolytica. Esto quiere decir que el huésped probablemente tenga una amibiasis asintomática, o tal vez se enferme seguido del estómago, pero no de manera tan grave. Se necesitarían por lo menos otras dos muestras y hacer frotis directos de ellas para confirmar el diagnóstico de amibiasis.

 

Tampoco hay que menospreciar la gran cantidad de bacterias halladas, muy probablemente bacilos de Escherichia coli, una bacteria común en el tubo digestivo, que dependiendo su serotipo puede ser benigna o patógena, pero eso ya no corresponde a la parasitología.

  CONCLUSIÓN

  Esta técnica es una más de los métodos de concentración por medio de flotación, y es capaz de concentrar prácticamente todos los huevos de nematodos.

 

Es altamente recomendado  para el diagnóstico de ancylostomideos y basa su capacidad diagnostica en el menor peso específico de los huevos contenidos en la solución saturada de NaCl, la cual posee una densidad de 1.200, lo que permite la flotación de los huevecillos y quistes de estos, cuyo peso es menor a este parámetro.

 Sin embargo, el método de Willis tiene la desventaja de que resulta ser menos sensible para el diagnóstico de T. trichiura y A. lumbricoides, pues sus huevecillos no siempre tienen una densidad menor a 1.200

  

Fuentes consultadas:

·         Directo, Willis, Kato, Kato cuantitativo, Faust, coloración rápida. Morfología de cestodos y helmintología, artículo consultado el día 21 de septiembre en http://usuarios.multimania.es/paraelsa/manual04/practica-6.htm

·         Análisis coprológico parasitario, documento en formato pdf consultado el día 21 de septiembre en http://personal.us.es/cariza/web/para/practicas/cuadernos/analisis-coprologico-parasitario.pdf

·         Método de Willis, consultado el día 21 de septiembre en http://www.buenastareas.com/ensayos/Metodo-De-Willis/40633.html